苯基疏水色譜柱是一種基于苯基基團(tuán)修飾的填料實(shí)現(xiàn)樣品分離的色譜柱，廣泛應(yīng)用于生物大分子（如蛋白質(zhì)、多肽）及芳香族化合物的分離分析。其核心原理在于苯基基團(tuán)通過化學(xué)鍵合固定在硅膠或其他基質(zhì)上，形成穩(wěn)定的疏水層，利用疏水作用及π-π電子相互作用實(shí)現(xiàn)分離。

　　其分離效果依賴于鹽濃度調(diào)控。高鹽環(huán)境下，樣品疏水區(qū)域暴露，與填料結(jié)合緊密；鹽濃度降低時(shí)，疏水作用減弱，樣品逐漸洗脫。此外，苯環(huán)與芳香族化合物之間可形成π-π相互作用，為含芳香環(huán)的化合物提供獨(dú)t的選擇性，尤其適用于分析帶有吸電子基團(tuán)的芳香化合物。

　　苯基疏水色譜柱在安裝前的細(xì)節(jié)操作：

　　1、柱接頭匹配與安裝方向

　　確認(rèn)色譜柱接頭類型與儀器接口一致（如標(biāo)準(zhǔn)不銹鋼接頭、PEEK手緊接頭），若不匹配，需使用適配的轉(zhuǎn)接頭（避免強(qiáng)行安裝導(dǎo)致接頭損壞）。

　　注意色譜柱流向：柱身上標(biāo)注有“IN”（入口）和“OUT”（出口），安裝時(shí)需與儀器流路方向一致（入口接泵/進(jìn)樣器，出口接檢測(cè)器），反向安裝會(huì)導(dǎo)致柱效下降。

　　2、排除氣泡與平衡柱床

　　卸下色譜柱兩端的堵頭，立即將入口端連接到儀器管路（避免空氣進(jìn)入柱床），出口端先不接檢測(cè)器，用低流速（如0.1-0.2mL/min）泵入保存溶劑或初始流動(dòng)相，緩慢排出柱內(nèi)氣泡（觀察出口端流出液，直至無氣泡連續(xù)排出）。

　　連接出口端到檢測(cè)器，逐步提高流速至實(shí)驗(yàn)流速（如1mL/min），用初始流動(dòng)相平衡色譜柱（通常平衡10-20柱體積，直至基線穩(wěn)定），確保固定相充分溶脹并達(dá)到平衡狀態(tài)。

　　3、避免干柱與劇烈沖擊

　　色譜柱安裝前需保持濕潤，嚴(yán)禁長時(shí)間暴露在空氣中導(dǎo)致固定相干涸（若不慎干涸，需用低濃度有機(jī)溶劑緩慢沖洗，不可直接用高流速流動(dòng)相沖擊）。

　　安裝過程中輕拿輕放，避免劇烈振動(dòng)或撞擊柱體，防止固定相塌陷或填充不均。